地方流行性牛白血病诊断技术NYT574-2023.pdf

2023?12?22发布2024?05?01实施地方流行性牛白血病诊断技术41中华人民共和国农业行业标准备案号：XXXX-XXXX11.220CCS B5742023Diagnostic techniques for enzootic bovine leukosis中华人民共和国农业农村部发 布代替 NY/T?5742002N Y/T 前言本文件按照G B/T 标准化工作导则第部分:标准化文件的结构和起草规则 的规定起草.本文件代替NY/T 地方流行性牛白血病琼脂凝胶免疫扩散试验方法,与NY/T 相比,除结构调整和编辑性改动外,主要技术变化如下:a)更改了本文件的适用范围(见第章,年版的第章);b)增加了术语与定义(见第章);c)增加了缩略语(见第章);d)增加了临床诊断(见第章);e)增加了样品采集、保存与运输(见第章);f)增加了病原分离(见第章);g)增加了巢式P C R(见第章);h)增加了实时荧光P C R(见第章);i)增加了阻断E L I S A(见第 章);j)增加了琼脂凝胶免疫扩散中试剂耗材、仪器设备、加样、孵育、实验成立条件(见 、);k)更改了琼脂凝胶免疫扩散中琼脂平板制备(见 ,年版的 )、打孔(见 ,年版的 )、结果判定(见 ,年版的 );l)增加了综合判定(见第 章).请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.本文件由农业农村部畜牧兽医局提出.本文件由全国动物卫生标准化技术委员会(S A C/T C )归口.本文件起草单位:中国动物疫病预防控制中心、青海省动物疫病预防控制中心、北京亿森宝生物科技有限公司、重庆市动物疫病预防控制中心、上海市动物疫病预防控制中心、四川省动物疫病预防控制中心、陕西省动物疫病预防控制中心、陕西省动物卫生与屠宰管理站.本文件主要起草人:孙雨、王传彬、顾小雪、翟新验、杨林、刘颖昳、徐琦、毕一鸣、蔡金山、阚威、王新杰、孙晓明、高姗姗、白雪冬、曾政、董春霞、骆璐、赵洪进、王建、杨显超、陈斌、陈弟诗、赵光明、朱宝、齐亚辉、孙航、胡冬梅、冯冰.本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为:年首次发布为NY/T 地方流行性牛白血病琼脂凝胶免疫扩散试验方法;本次为第一次修订.N Y/T 地方流行性牛白血病诊断技术范围本文件规定了牛白血病的临床诊断、样品采集与处理、病原学和血清学方法的技术要求.本文件适用于牛白血病的诊断、检测、检疫、监测和流行病学调查.规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件.G B/T 分析实验室用水规格和试验方法G B 实验室生物安全通用要求术语和定义下列术语和定义适用于本文件.地方流行性牛白血病 e n z o o t i cb o v i n e l e u k o s i s一种以淋巴样细胞恶性增生,进行性恶病质变化和全身淋巴结肿大为特征的一种慢性、进行性、接触传染性肿瘤病.由反转录病毒科肿瘤病毒亚科中的牛白血病病毒(B o v i n e l e u k a e m i av i r u s,B L V)引起.聚合酶链式反应p o l y m e r a s e c h a i nr e a c t i o n利用一段D NA为模板,在D NA聚合酶和核苷酸底物共同参与下,将该段D NA扩增至足够数量,以便进行结构和功能分析.实时荧光P C R r e a l t i m eP C R一种利用荧光信号、累积实时监测整个P C R进程的试验方法.C t值 c y c l e t h r e s h o l d每个实时荧光P C R反应管内的荧光信号量达到设定的阈值所经历的循环次数.琼脂凝胶免疫扩散a g a rg e l i mm u n o d i f f u s i o n琼扩试验在琼脂凝胶中进行的抗原抗体免疫沉淀反应,可用于血清学定型.酶联免疫吸附试验 e n z y m e l i n k e d i mm u n o s o r b e n t a s s a y由酶分子与抗体分子共价结合形成酶标记抗体.此种结合不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性.通过此种酶标记抗体与吸附在固相载体上的抗原发生特异性结合,当加入底物溶液后,底物可在酶作用下出现显色反应.此种显色反应可通过酶标仪进行定量测定,从而通过底物的显色反应来判定有无相应的免疫反应.缩略语下列缩略语适用于本文件.N Y/T AG I D:琼脂凝胶免疫扩散(a g a rg e l i mm u n o d i f f u s i o n)D NA:脱氧核糖核酸(d e o x y r i b o n u c