农业农村部公告第600号 动物毛发中克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇和苯乙醇胺A的测定 液相色谱–串联质谱法.pdf

中华人民共和国农业农村部公告第 600 号根据兽药管理条例饲料和饲料添加剂管理条例规定,我部组织制定了动物毛发中克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇和苯乙醇胺 A 的测定 液相色谱串联质谱法检测方法,现予发布,自发布之日起实施。特此公告。附件:动物毛发中克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇和苯乙醇胺 A 的测定 液相色谱串联质谱法农业农村部2022 年 9 月 3 日1 附件 动物毛发中克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇和苯乙醇胺 A 的测定 液相色谱串联质谱法 1 范围 本方法规定了动物毛发中克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇和苯乙醇胺A残留的液相色谱串联质谱测定方法。本方法适用于猪、牛和羊的毛发中克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇和苯乙醇胺A残留量的测定。2 原理 动物毛发经清洗、烘干、粉碎处理后，经盐酸溶液水解，固相萃取柱净化，液相色谱串联质谱仪测定，同位素内标法定量。3 试剂和材料 以下所用试剂，除特别注明外均为分析纯试剂，水为符合分析实验室用水规格和试验方法（GB/T 6682）规定的一级水。3.1 试试剂剂 3.1.1 乙腈（C2H3N）：色谱纯。3.1.2 甲酸（CH2O2）：色谱纯。3.1.3 甲醇（CH4O）：色谱纯。2 3.1.4 十二烷基磺酸钠（C12H25SO3Na）。3.1.5 盐酸（HCl）：含量36%38%。3.1.6 氨水（NH3 H2O）：含量25%28%。3.2 溶溶液液配配制制 3.2.1 十二烷基磺酸钠溶液：称取十二烷基磺酸钠10 g，加水溶解并稀释至1000 mL，混匀。3.2.2 0.1 mol/L盐酸溶液：量取盐酸8.3 mL，加水稀释至1000 mL，混匀。3.2.3 0.1%甲酸溶液：量取甲酸1 mL，加水稀释至1000 mL，混匀。3.2.4 0.1%甲酸乙腈溶液：量取乙腈10 mL，加入0.1%甲酸溶液90 mL，混匀。3.2.5 5%氨水甲醇溶液：量取氨水5 mL，加入甲醇95 mL，混匀。3.3 标标准准品品 3.3.1 盐酸克仑特罗、盐酸莱克多巴胺、沙丁胺醇和苯乙醇胺A，纯度均98.0%。详见附录1。3.3.2 克仑特罗D9、盐酸莱克多巴胺D3、沙丁胺醇-D3和苯乙醇胺AD3，纯度均98.0%。详见附录1。3.4 标标准准溶溶液液的的制制备备 3.4.1 克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇和苯乙醇胺A标准储备溶液（1 mg/mL）：取约10 mg标准品（以克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇和苯乙醇胺A计），精密称定，分别置于10 mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，配成 3 浓度均为1 mg/mL的标准储备溶液。18以下保存，有效期12个月。3.4.2 内标储备溶液（1 mg/mL）：取约10 mg标准品（以克仑特罗D9、莱克多巴胺D3、沙丁胺醇D3和苯乙醇胺AD3计），精密称定，分别置于10 mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，配成浓度均为1 mg/mL的内标储备溶液。18以下保存，有效期12个月。3.4.3 混合标准中间溶液（10 g/mL）：分别吸取标准储备溶液0.10 mL，置于10 mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，配成浓度为10 g/mL混合标准中间溶液。18以下保存，有效期12个月。3.4.4 混合标准工作溶液（100 ng/mL）：吸取混合标准中间液0.10 mL，置于10 mL棕色容量瓶中，用0.1%甲酸乙腈溶液溶解并稀释至刻度，配成浓度为100 ng/mL混合标准工作溶液，现配现用。3.4.5 混合内标中间溶液（10 g/mL）：分别吸取内标储备液0.10 mL，置于10 mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，配成浓度为10 g/mL混合内标中间溶液。18以下保存，有效期12个月。3.4.6 混合内标工作溶液（100 ng/mL）：吸取混合内标中间液0.10 mL，置于10 mL棕色容量瓶中，用0.1%甲酸乙腈溶液溶解并稀释至刻度，配成浓度为100 ng/mL混合内标工作溶液，现配现用。3.5 材材料料 4 3.5.1 固相萃取柱：混合型阳离子交换柱，60 mg/3 mL，或性能相当者。3.5.2 微孔滤膜：孔径0.22 m，疏水型。4 仪器和设备 4.1 液相色谱串联质谱仪：配有电喷雾电离源（ESI）。4.2 分析天平：感量0.00001 g和0.001 g。4.3 超声波清洗器。4.4 电热干燥箱，控温精度2。4.5 球磨机：振动频率不低于60 Hz。4.6 干燥器。4.7 旋涡振荡器。4.8 恒温水浴：控温精度1。4.9 离心机：转速不低于7000 r/min。4.10 氮吹仪。4.11 固相萃取装置。5 试料的制备与保存 5.1 样样品品采采集集 选取动物背部毛发，从根部剪断，保存备用。采集毛发的质量应不少于4 g。5.2 样样品品制制备备 取2