尿中12-双羟基-4-（N-乙酰半胱氨酸）-丁烷测定标准液相色谱-串联质谱法GBZT330-2024.pdf

ICS 13.100CCS C 52中华人民共和国国家职业卫生标准GBZ/T 3302024尿中 1,2-双羟基-4-(N-乙酰半胱氨酸)-丁烷测定标准液相色谱-串联质谱法Determination standard of 1,2-dihydroxy-4-(N-acetylcysteine)-butane in urineLiquid chromatography-tandem mass spectrometry2024-03-11 发布2024-09-01 实施GBZ/T 3302024I前言本标准为推荐性标准。本标准由国家卫生健康标准委员会职业健康标准专业委员会负责技术审查和技术咨询，由中国疾病预防控制中心负责协调性和格式审查，由国家卫生健康委职业健康司负责业务管理、法规司负责统筹管理。本标准起草单位：山东省职业卫生与职业病防治研究院、山东省疾病预防控制中心、山东省产品质量检验研究院、泰安市疾病预防控制中心、江苏省疾病预防控制中心、复旦大学。本标准主要起草人：赵敬、程学美、邵华、宋利群、周莉莉、刘冰、张天亮、朱宝立、夏昭林。GBZ/T 33020241尿中 1,2-双羟基-4-(N-乙酰半胱氨酸)-丁烷测定标准液相色谱-串联质谱法1范围本标准规定了测定尿中1,3-丁二烯代谢产物1,2-双羟基-4-（N-乙酰半胱氨酸）-丁烷（DHBMA）的液相色谱-串联质谱法。本标准适用于职业接触1,3-丁二烯人员尿中1,2-双羟基-4-（N-乙酰半胱氨酸）-丁烷（DHBMA）浓度的测定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本标准必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本标准；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。GBZ/T 295职业人群生物监测方法 总则WS/T 97尿中肌酐分光光度测定方法WS/T 98尿中肌酐的反相高效液相色谱测定方法3术语和定义GBZ/T 295界定的术语和定义适用于本标准。4原理尿样经乙酸铵溶液稀释，微孔滤膜过滤后用液相色谱-串联质谱仪检测，以保留时间和特征离子丰度比值进行定性，同位素内标校准曲线法定量。5仪器5.1漩涡震荡器。5.2微孔滤膜：0.45m，水相。5.3具塞聚乙烯塑料瓶：15mL、50mL。5.4离心管：2mL。5.5液相色谱-串联三重四级杆质谱仪（LC-MS/MS）。仪器操作参考条件：a)色谱条件：色谱柱：四乙氧基硅氧烷键合的硅胶颗粒，T3 1.8m，规格：2.1mm150mm；柱温：40；进样量：5L；流动相：15mmol/L乙酸铵(pH：6.8)：乙腈；梯度洗脱条件见表1。GBZ/T 33020242表 1梯度洗脱条件时间min流速L/min15mmol/L 乙酸铵%乙腈%-2509732.002509553.0025090105.0025070306.5025060407.0025070307.5025090108.00250973b)质谱条件：离子源：电喷雾离子源；离子化模式：负离子模式；扫描模式：多反应监测模式（MRM）；离子源温度（TEM）：650；电喷雾离子电压（IS）：-4000V；碰撞气（CAD）：7psi；气帘气（CUR）：45psi；雾化气（GS1）：55psi；辅助气（GS2）：65psi；多反应监测条件见表2。表 2多反应监测条件化合物名称母离子m/z子离子m/z去簇电压v碰撞电压eVDHBMA(定量)250.0121.0-70-20DHBMA(定性)250.0127.9-70-32DHBMA-D7257.3127.7-55-186试剂6.1实验用水：去离子水。6.2甲醇：色谱纯。6.3异丙醇：色谱纯。6.4乙酸铵：色谱纯。6.5乙腈：色谱纯。6.6DHBMA，标准物质或标准品（纯度95%）。6.7DHBMA-D7，标准物质或标准品（纯度95%）。6.8乙酸铵溶液（15mmol/L）：精确称取 2.31g 乙酸铵，置于烧杯中，加入少量去离子水，超声 10min后，用去离子水溶解并定容至 2L，该溶液 pH 约为 6.8。6.9标准贮备液：精确称取适量 DHBMA，用去离子水溶解并定容，配制成浓度为 1000.0mg/L 的标准贮备溶液，此溶液在 4条件下可稳定保存 3 个月。6.10标准应用溶液：用去离子水将 DHBMA 标准贮备溶液稀释成浓度分别为 10.0mg/L、1.0mg/L、100.0g/L 的标准应用溶液。6.11内标贮备溶液：精确称取适量 DHBMA-D7，用去离子水溶解并定容，配制成浓度为 1000.0mg/L的内标贮备溶液。GBZ/T 330202436.12内标应用溶液：用去离子水将内标贮备溶液稀释，配制成浓度为 600.0g/L 的 DHBMA-D7 内标应用溶液。7样品采集、运