番茄病毒RT-PCR检测技术规程DB15T4109-2025.pdf

《番茄病毒RT-PCR检测技术规程》讲解了番茄病毒RT-PCR检测技术的适用范围、规范性引用文件、术语定义、检测对象、抽样与取样方法以及具体的检测操作流程。该技术规程适用于内蒙古自治区境内番茄栽培过程中常见RNA病毒和DNA病毒的检测，包括苜蓿花叶病毒（AMV）、黄瓜花叶病毒（CMV）、番茄斑萎病毒（TSWV）以及番茄黄化曲叶病毒（TYLCV）等多种病毒。文件详细明确了抽样面积和数量，根据不同的种植区域设置不同的抽检株数。取样时选取新鲜叶片，并根据不同距离和运输时间选择适当方式保存样品，短期保存为4℃存放，长期保存要求液氮预冷并储存于-80℃环境中。检测过程中涵盖样品前处理、核酸提取、质量评价、反转录（仅用于RNA病毒）、PCR扩增及反应体系设置。文件明确了各步骤的引物序列和对应的反应程序参数，如变性温度、循环次数、退火时间和温度、延伸时间和最终终延伸参数。此外引用的相关国家标准为检测过程的科学性和可执行性提供了保障，确保检测结果准确性、规范性和一致性。

《番茄病毒RT-PCR检测技术规程》适用于农业植保部门、科研院所、检测机构和番茄生产基地在番茄病毒感染防控中开展检测工作。规程中涵盖的技术内容可用于番茄种植领域从业人员进行标准化检测，帮助精准识别田间病毒感染情况，指导科学合理的防治措施，提高农作物安全性和产量稳定性。同时，该标准也可用于番茄种苗检疫及病毒病流行趋势监测中，具有广泛的推广应用价值。