生金枪鱼肉种类鉴定方法 实时荧光PCR法SCT3062-2025.pdf

《生金枪鱼肉种类鉴定方法 实时荧光PCR法SCT3062-2025》讲解了利用实时荧光PCR技术对生金枪鱼肉进行物种鉴别的标准化检测流程。该标准规定了检测的原理、所需试剂与材料、仪器设备要求、样品制备、DNA提取与浓度测定、扩增反应体系构建、检测程序、质量控制措施以及结果判定依据，并明确了防污染操作规范。检测原理基于不同金枪鱼物种在SrRNA基因区域存在的单核苷酸多态性（SNP）位点，设计特异性引物和探针，通过实时荧光PCR技术扩增目标片段，依据扩增曲线形态和Ct值对样本进行定性判定。方法可准确区分马苏金枪鱼、大目金枪鱼、长鳍金枪鱼、蓝鳍金枪鱼和黄鳍金枪鱼五种常见商业金枪鱼种类，确保生金枪鱼产品的真实性与标签合规性。文件强调实验所用水应符合GB/T一级水标准，所有试剂材料不得含有外源DNA或DNA酶，避免交叉污染影响结果准确性。标准还列出了关键试剂如CTAB裂解液、蛋白酶K、Taq DNA聚合酶、ROX荧光参比染料等的具体配制与使用要求，并提供了引物与探针序列的附录信息。整个检测过程遵循实验室质量控制规范，确保检测结果的可靠性、重复性和可比性。该标准为首次发布，填补了我国在金枪鱼物种分子鉴别领域缺乏行业统一方法的技术空白。

《生金枪鱼肉种类鉴定方法 实时荧光PCR法SCT3062-2025》适用于水产加工企业、市场监管部门、进出口检验检疫机构、第三方检测实验室及科研单位等从事水产品真伪鉴定与质量控制的相关人员。该标准特别适用于对生金枪鱼肉产品的物种真实性进行定性分析，广泛服务于海产品溯源管理、食品安全监管、打击市场欺诈行为以及保护消费者权益等领域。由于方法基于分子生物学技术，尤其适合处理经过初步加工但仍保留细胞结构的生鲜金枪鱼产品，不适用于DNA严重降解或混合来源的复杂样品。相关从业人员需具备分子生物学实验基础，熟悉DNA提取、PCR操作和荧光定量仪器使用流程，并能在符合生物安全与防污染要求的实验室环境中执行检测任务。该标准也为渔业管理部门制定法规、开展专项整治行动提供了技术支持和科学依据。