甜菜根腐病镰刀菌分子检测与鉴定技术规程TZBXH 142-2025.pdf

《甜菜根腐病镰刀菌分子检测与鉴定技术规程TZBXH 142-2025》讲解了针对引起甜菜根腐病的镰刀菌进行系统性分子检测与科学鉴定的技术流程。该文件规定了从田间病样采集、病原菌分离纯化、形态学观察到分子生物学鉴定及致病性验证的全过程操作规范。《甜菜根腐病镰刀菌分子检测与鉴定技术规程TZBXH 142-2025》描述了甜菜根腐病的典型症状，包括地上部叶片黄化、萎蔫、植株矮化以及地下块根尖端黑色腐烂、维管束褐变等特征，并明确了样品采集应选择病健交界组织以提高分离准确性。在实验室操作方面，文件详细说明了使用PDA培养基结合抗生素抑制杂菌的分离方法，采用单孢分离法实现菌株纯化，并提供了短期冷藏和液体石蜡封存两种保存方式。形态学鉴定涵盖了菌落特征、孢子形态及分隔情况等关键指标。分子鉴定部分重点推荐使用ITS1/ITS4和EF1/EF2引物对rDNA-ITS和EF-1α基因区域进行PCR扩增，扩增产物经测序后需在NCBI和Fusarium MLST数据库中进行BLAST比对，一致性高于99%方可确定种属。同时，规程还设定了致病性测定步骤，包括甜菜植株培育、孢子悬浮液制备、浸根接种及再分离验证，确保所鉴定菌株具有实际致病能力。整个技术体系融合传统微生物学与现代分子生物技术，提升了检测准确性与可重复性，为甜菜根腐病的早期诊断、精准防控和病原监测提供了标准化依据。

《甜菜根腐病镰刀菌分子检测与鉴定技术规程TZBXH 142-2025》适用于从事甜菜种植、植物病害研究与防治的农业科研机构、植物保护部门、种子检验机构及农业技术服务单位。该规程特别适用于新疆地区甜菜主产区的植保技术人员、病理实验室工作人员以及相关生产企业在病原检测、品种抗病性评估和病害预警体系建设中的实践应用。同时，本标准也可作为高校和研究院所在真菌分子生物学、作物病害诊断等领域的教学与科研参考依据。通过规范镰刀菌的分子检测流程，该文件为提升区域甜菜产业可持续发展能力、保障制糖原料安全供给提供了技术支持，对推动我国西北干旱区特色作物健康栽培具有重要意义。