流域典型水生生物环境 DNA 监测技术规范TACEF 227-2025.pdf

《流域典型水生生物环境 DNA 监测技术规范TACEF 227-2025》讲解了在长江和黄河流域开展基于环境DNA（eDNA）技术的水生生物监测的完整技术体系。该文件明确了浮游动物、浮游藻类和鱼类等典型水生生物类群在河流、湖泊和水库中的eDNA采样与检测流程，涵盖了从前期准备到数据分析的全过程。规范详细规定了试剂耗材的选择标准，强调使用无DNA酶、无RNA酶的实验器材以避免交叉污染；对样点布设提出了代表性、空间覆盖性和可重复性的原则，确保监测结果具备区域代表性和长期可比性。在水样采集环节，明确了不同水体类型的采样深度、体积及频率要求，并规范了过滤方法与滤膜选择。对于DNA提取与纯化，推荐使用经过验证的商业试剂盒并规定提取环境需符合实验室生物安全要求。PCR扩增部分指定了针对18S rDNA（用于浮游生物）和12S rDNA（用于鱼类）的引物系统，支持DNA宏条形码技术的应用。测序环节建议采用二代高通量测序平台，数据分析中应通过OTU聚类、序列相似性比对和参考数据库匹配进行物种鉴定。整个过程贯穿严格的质量控制措施，包括设置阴性对照、阳性对照以及实验室间数据可比性校验，并明确了废弃物处理的环保与安全要求。附录提供了包括采样记录表、流域特有物种引物信息、常用标记基因序列及监测物种统计在内的实用资料，增强了标准的操作性。

《流域典型水生生物环境 DNA 监测技术规范TACEF 227-2025》适用于生态环境监测机构、水利水务部门、科研单位及第三方检测服务机构，在长江和黄河流域从事水生态健康评估、生物多样性调查、珍稀濒危物种监测及水生生态系统保护工作的技术人员与管理人员。该规范特别适用于需要非侵入性、高灵敏度手段进行水生生物监测的场景，如保护区物种分布核查、外来入侵种早期预警、水质生态评价等。同时，高校和研究机构在开展环境基因组学、生态毒理学或流域综合管理相关课题时，也可将本规范作为标准化实验流程的技术依据。由于其聚焦于eDNA宏条形码技术的实际应用，对于推动传统水生生物监测向分子化、自动化转型具有指导意义，适用于具备分子生物学实验能力并致力于提升生态监测效率与精度的专业团队。