三七种子种苗腐皮镰刀菌检测方法NYT4524-2025.pdf

《三七种子种苗腐皮镰刀菌检测方法NYT4524-2025》讲解了针对三七种子和种苗中腐皮镰刀菌的系统性检测技术标准，为保障三七种植源头的生物安全提供了科学依据和技术支撑。该文件详细规定了三种并行且互补的检测手段：形态学检测方法、PCR检测方法以及实时荧光定量PCR（qPCR）检测方法。形态学检测以马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）和Komada选择性培养基为基础，结合真菌培养与显微观察，通过对菌落形态、菌丝结构及分生孢子特征进行鉴定，实现对腐皮镰刀菌的直观识别。在样品处理方面，文件明确区分了种子外部与内部病原检测流程，规定了无菌水振荡、梯度稀释、表面消毒、组织研磨等关键步骤，并对种苗样本的采集、消毒与研磨过程作出严格规范。对于分子生物学检测，PCR方法基于腐皮镰刀菌特有的TEF-1α基因序列设计特异性引物，通过扩增目标DNA片段并进行琼脂糖凝胶电泳分析，判断样品中是否存在该病原体。实时荧光定量PCR则进一步提升了检测灵敏度与准确性，可实现对病原菌的定量分析。文档还列出了各类实验所需仪器设备、试剂配置方案及操作参数，如离心速度、培养温度、重复次数和保存条件，确保检测过程的标准化和可重复性。此外，标准明确了适用范围、引用规范、缩略语定义，并附有腐皮镰刀菌的基础生物学信息作为参考依据，体现出高度的专业性与实用性。

《三七种子种苗腐皮镰刀菌检测方法NYT4524-2025》适用于从事中药材尤其是三七种植、育种、良种繁育及病害防控的相关科研机构、农业技术服务单位、种子种苗生产企业和中药材质量监管部门。该标准尤其适用于开展三七种质资源健康检测、田间病害溯源、繁殖材料认证及出口检验检疫的技术人员与实验室检测人员。同时，该文件也适用于农业农村部门下属的植物保护站、农产品质量安全检测中心以及第三方检测机构，在开展三七作物真菌性病害监测与风险评估工作中提供标准化技术指导。此外，高校和科研院所中从事植物病理学、分子生物学、药用植物栽培等领域的研究人员也可依据此标准开展相关研究工作，提升检测结果的权威性和可比性。