甜瓜品种鉴定 SSR分子标记法NYT4489-2025.pdf

《甜瓜品种鉴定 SSR分子标记法NYT4489-2025》讲解了利用简单重复序列（SSR）分子标记技术对甜瓜（Cucumis melo L.）品种进行DNA分子水平鉴定的标准化方法。该文件明确了甜瓜品种鉴定中的术语定义、缩略语、实验原理、仪器设备、试剂溶液配制、引物信息、参照品种使用、操作流程以及结果判定与表述等关键环节。其核心原理基于不同甜瓜品种在基因组SSR位点上的重复次数存在多态性，通过PCR扩增和电泳检测这些差异，实现品种间的有效区分。文件详细规定了DNA提取的操作步骤，包括采用CTAB法提取组织样本中的高质量DNA，并对其浓度和纯度提出明确要求（O.D260/O.D280比值应在1.7～2.0之间）。对于PCR反应体系，文件列出了各组分的推荐终浓度和体积，涵盖缓冲液、dNTPs、Taq酶、上下游引物及模板DNA，并给出了标准热循环程序。同时，依据检测手段的不同，区分了普通引物与荧光标记引物的应用场景，推荐在变性PAGE检测中使用普通引物，在荧光毛细管电泳中采用荧光标记引物。引物序列信息及相关参数以附录形式提供，确保方法的可重复性和规范性。在操作程序中强调样品代表性，要求每份样本不少于10个个体混合分析，必要时进行单株检测，并规定了参照品种同步运行的原则，用于辅助判断等位基因变异。最终通过电泳图谱比对多个位点的扩增结果，依据是否发现差异位点作出品种一致性或差异性的判定。

《甜瓜品种鉴定 SSR分子标记法NYT4489-2025》适用于从事甜瓜种质资源管理、品种审定、植物新品种保护、种子质量监管、育种研发及分子检测技术服务的相关科研机构、检验检测单位、农业行政管理部门和种子企业。该标准为甜瓜品种的真实性与一致性鉴定提供了统一、可靠的技术依据，尤其适用于需进行DNA指纹图谱构建、品种权纠纷仲裁、品种注册备案及市场监督抽查等场景。从事分子生物学实验的技术人员可依据本文件开展标准化操作，确保检测结果的准确性和可比性，同时也为国家层面建立甜瓜分子身份证数据库提供技术支持。此外，该标准对于推动我国瓜类作物知识产权保护、规范种子市场秩序、促进甜瓜产业健康发展具有重要意义。