芥菜品种鉴定 SSR分子标记法NYT4495-2025.pdf

《芥菜品种鉴定 SSR分子标记法》讲解了利用简单重复序列（SSR）分子标记技术对芥菜（Brassica juncea L.）品种进行科学鉴定的标准化操作流程。该文件规定了从样品准备、DNA提取、PCR扩增、电泳检测到结果统计与判定的完整技术体系，适用于芥菜品种的指纹图谱构建、数据库建设以及品种真实性、纯度和稳定性的鉴定工作。《芥菜品种鉴定 SSR分子标记法》描述了SSR标记的基本原理，即不同芥菜品种在基因组中特定SSR位点的重复次数存在多态性，这种遗传差异可通过PCR扩增后电泳分离进行可视化检测，从而实现品种间的有效区分。文件明确了实验所需的主要仪器设备、试剂配制方法、引物信息及参照品种的选择要求，并提供了详细的溶液配制方案（附录B）、引物名单与序列（附录C）、荧光标记建议（附录D）以及标准参照品种数据（附录E），确保检测结果的可比性和标准化。在操作程序上，强调了样品代表性，推荐每份样本至少取多个个体混合分析，同时规范了DNA提取过程中的研磨、抽提、沉淀与溶解步骤，提出了DNA浓度与纯度检测的标准（OD260/OD280比值应在1.7~2.0之间）。对于PCR反应体系，给出了包含缓冲液、dNTPs、Taq酶、上下游引物和模板DNA的具体组分及其终浓度，并指出根据检测手段（变性PAGE或荧光毛细管电泳）选择非标记或荧光标记引物。反应程序涵盖预变性、循环扩增和最终延伸等关键步骤，允许根据设备和条件微调参数。检测阶段详细说明了变性聚丙烯酰胺凝胶的制备流程，包括玻璃板处理、硅烷涂布、灌胶与聚合过程。

《芥菜品种鉴定 SSR分子标记法》适用于从事芥菜种质资源管理、品种审定、种子质量监管、植物新品种保护及科研育种等相关领域的机构和技术人员。该标准为农业科研院所、种子检验检测中心、农作物种业企业、植物品种权保护单位以及地方农业农村主管部门提供了一套统一、准确、可重复的分子鉴定技术规范。尤其在品种真实性验证、侵权纠纷鉴定、种子纯度分析和种质资源保护等方面具有重要应用价值。同时，本标准也适用于参与国家或省级芥菜品种区域试验、登记管理和市场监管的技术支撑工作，助力提升我国芥菜品种管理的科学化、标准化和现代化水平。