食品安全国家标准 牛可食性组织中吡利霉素残留量的测定GB31613.4-2022.pdf

中华人民共和国国家卫生健康委员会食品安全国家标准牛可食性组织中吡利霉素残留量的测定液相色谱-串联质谱法22中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准备案号：XXXX-XXXX67.120X31613.42022National food safety standardDetermination of pirlimycin residue in bovine edible tissuesby liquid chromatography-tandem mass spectrometric methodGB2022?09?20发布2023?02?01实施发 布国 家 市 场 监 督 管 理 总 局中 华 人 民 共 和 国 农 业 农 村 部CCSG B 前言本文件按照G B/T 标准化工作导则第部分:标准化文件的结构和起草规则 的规定起草.本文件系首次发布.G B 食品安全国家标准牛可食性组织中吡利霉素残留量的测定液相色谱串联质谱法范围本文件规定了牛可食性组织中吡利霉素残留检测的制样和液相色谱串联质谱测定方法.本文件适用于牛肌肉、肝脏、肾脏和脂肪中吡利霉素的残留检测.规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件.G B/T 分析实验室用水规格和试验方法术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义.原理试料中残留的吡利霉素,用甲酸乙腈溶液提取,固相萃取柱净化,液相色谱串联质谱测定,基质匹配标准溶液外标法定量.试剂与材料除另有规定外,所有试剂均为分析纯,水为符合G B/T 规定的一级水.试剂 乙腈(CHC N):色谱纯.甲醇(CHOH):色谱醇.甲酸(HC OOH):色谱纯.无水硫酸钠(N aS O).氯化钠(N a C l).溶液配制 甲酸乙腈溶液:取甲酸m L,用乙腈稀释至 m L.甲酸乙腈溶液:取甲酸m L,用乙腈稀释至 m L.甲酸溶液:取甲酸m L,用水稀释至 m L.甲醇溶液:取甲醇 m L,用水稀释至 m L.标准品吡利霉素(P i r l i m y c i n,C H C l NOS,C A S号:),含量 .标准溶液的制备 标准储备液:精密称取吡利霉素标准品约 m g,于 m L容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,配制成浓度为m g/m L的吡利霉素标准储备液.以下保存,有效期 个月.标准中间液:精密量取吡利霉素标准储备液 m L,于 m L容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,配制成浓度为 g/m L的吡利霉素标准中间液.保存,有效期个月.G B 标准工作液:精密量取吡利霉素标准中间液 m L,于 m L容量瓶中,用 甲醇稀释至刻度,配制成浓度为 n g/m L的吡利霉素标准工作液.保存,有效期个月.材料 固相萃取小柱:基质增强脂肪去除柱(m g/m L),或相当者.陶瓷均质子.亲水性聚四氟乙烯微孔滤膜:m.仪器和设备 液相色谱串联质谱仪:配有电喷雾离子源(E S I).分析天平:感量 g和 g.涡旋混合器.高速离心机.试样的制备与保存 试样的制备取适量新鲜或解冻的空白或供试样品,绞碎并均质.a)取均质后的供试样品,作为供试试样;b)取均质后的空白样品,作为空白试样;c)取均质后的空白样品,添加适宜浓度的标准工作液,作为空白添加试样.试样的保存 以下保存.测定步骤 提取称取试料g(准确至 g)于 m L离心管中,加入陶瓷均质子,加入甲酸乙腈溶液 m L,涡旋 s,加入无水硫酸钠g、氯化钠g,涡旋 s,下 r/m i n离心m i n后,快速移取上层乙腈 m L至另一离心管中,加水 m L,混匀,备用.净化将备用液直接过固相萃取小柱,自然流出,收集滤液,并挤干.取滤液适量过微孔滤膜后,供液相色谱串联质谱仪测定.基质匹配标准曲线的制备精密量取吡利霉素标准工作液适量,用提取净化后的空白试样溶液稀释成含药物浓度分别为n g/m L、n g/m L、n g/m L、n g/m L、n g/m L和 n g/m L的基质匹配系列标准溶液,从中各取 m L,过微孔滤膜上机测定.以特征离子质量色谱峰面积为纵坐标、基质匹配标准溶液浓度为横坐标,绘制标准曲线.测定 液相色谱参考条件a)色谱柱:五氟苯基柱(mm mm,m),或性能相当者.b)流动相:A为 甲酸溶液,B为 甲酸乙腈溶液.流动相梯度:m i n m i n保持 B;m i n m i n,B线性变化到 B;m i n m i n保持 B;m i n m i n保持 B.c)流速:m L/m i n.d)进样量:L.G B e)柱温:.串联质谱参考条件a)离子源:电喷雾离子源;b)扫描方式:正离子扫描;c)检测方式:多反应离子监测(MRM)