动物源伪结核棒状杆菌分离与鉴定技术规程NYT4657-2025.pdf

《动物源伪结核棒状杆菌分离与鉴定技术规程NYT4657-2025》讲解了伪结核棒状杆菌从动物脓肿样品中的系统性分离、鉴定及保藏技术流程，明确了操作的标准化要求。《动物源伪结核棒状杆菌分离与鉴定技术规程NYT4657-2025》描述了该规程适用于动物源细菌耐药性监测工作中对伪结核棒状杆菌（Corynebacterium pseudotuberculosis）的实验室检测全过程，涵盖样品采集、保存运输、分离纯化、筛查鉴定以及菌株保藏等关键环节的技术规范。文件规定了所需试剂材料的质量标准，如分析纯试剂、三级水及特定培养基的配制方法，并列出了必要的仪器设备清单，包括生物安全柜、PCR仪、质谱仪等。在分离环节，推荐使用绵羊血琼脂平板进行划线培养，选取具有典型形态特征的菌落进行纯化。鉴定方法包括形态学检查、触酶试验、生化鉴定、PCR扩增和MALDI-TOF MS质谱分析三种可选方式。其中PCR法以16S rRNA基因为靶标，设定特异性引物，通过扩增产物大小和测序相似度不低于阈值判定阳性。质谱鉴定则要求按标准程序制备菌样并完成仪器校准，依据系统自动比对结果进行种属鉴定。文件还明确了阳性菌株的保藏条件与方法，强调所有操作须遵循GB 19489和NY/T相关标准中的生物安全防护要求，确保实验人员和环境安全。整体构建了一个科学、准确、可重复的病原菌检测技术体系，为兽医微生物实验室提供权威指导。

《动物源伪结核棒状杆菌分离与鉴定技术规程NYT4657-2025》适用于从事动物疫病防控、兽医微生物检测、细菌耐药性监测等相关工作的各级兽医实验室技术人员。该规程主要面向畜牧兽医机构、动物疾病预防控制中心、科研院所、高校实验平台及第三方检测机构中涉及动物源病原菌分离与鉴定的专业人员。尤其适用于处理羊、牛等反刍动物常见感染病原——伪结核棒状杆菌的实验室操作场景。此外，本规程也可供动物诊疗单位、养殖场疫病防控人员以及参与国家动物源细菌耐药性监测计划的相关工作人员参考使用。规程内容满足动物源细菌监测项目对数据准确性、可比性和可追溯性的要求，对提升我国动物源病原菌检测技术水平、规范实验室操作流程、保障生物安全具有重要实践意义。