食品安全国家标准 动物性食品中三氮脒残留量的测定GB31658.18-2022.pdf

中华人民共和国国家卫生健康委员会食品安全国家标准动物性食品中三氮脒残留量的测定高效液相色谱法04中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准备案号：XXXX-XXXX67.050X31658.182022National food safety standardDetermination of diminazene residue in animal derived foodby high performance liquid chromatography methodGB2022?09?20发布2023?02?01实施发 布国 家 市 场 监 督 管 理 总 局中 华 人 民 共 和 国 农 业 农 村 部CCSG B 前言本文件按照G B/T 标准化工作导则第部分:标准化文件的结构和起草规则 的规定起草.本文件系首次发布.G B 食品安全国家标准动物性食品中三氮脒残留量的测定高效液相色谱法范围本文件规定了动物性食品中三氮脒残留量检测的制样和高效液相色谱检测方法.本文件适用于牛、羊的肌肉、肝脏、肾脏组织和牛奶、羊奶中三氮脒残留量的检测.规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件.G B/T 分析实验室用水规格和试验方法术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义.原理试样中残留的三氮脒经乙腈水提取(奶中残留的三氮脒经乙酸乙腈溶液提取),弱阳离子交换固相萃取柱净化,高效液相色谱紫外法测定,外标法定量.试剂和材料以下所用的试剂,除特别注明外均为分析纯试剂;水为符合G B/T 规定的一级水.试剂 甲醇(CHOH):色谱纯.甲酸(HC OOH):色谱纯.甲酸铵(CHNO):色谱纯.氨水(NHHO).冰乙酸(CHC OOH).溶液配制 乙腈溶液:取乙腈 m L,加水 m L,混匀.乙酸乙腈溶液:取冰乙酸 m L,用乙腈稀释至 m L,混匀.氨水溶液:取氨水m L,加水 m L,混匀.乙酸甲醇溶液(p H ):取冰乙酸m L,加甲醇 m L,混匀,用氨水调节p H至 .m o l/L甲酸铵溶液(p H ):取甲酸铵 g,加水 m L溶解,用甲酸调节p H至 ,加水稀释至 m L.标准品二乙酰胺三氮脒(D i m i n a z e n ea c e t u r a t e,C H N CHNO,C A S号:),含量.标准溶液制备 标准储备液:取二乙酰胺三氮脒标准品适量(相当于三氮脒约 m g),精密称定,加水适量使溶解并稀释定容至 m L棕色容量瓶,配制成浓度为m g/m L的三氮脒标准储备液.避光保存,有效期G B 个月.标准工作液:精密量取m g/m L标准储备液m L,于 m L棕色容量瓶中,用水稀释至刻度,配制成浓度为 g/m L的三氮脒标准工作液.避光保存,有效期d.材料 弱阳离子交换固相萃取柱:m g/m L,或相当者.微孔尼龙滤膜:m.仪器和设备 高效液相色谱仪:配紫外检测器或二极管阵列检测器.分析天平:感量 g和 g.p H计.涡旋混合器.涡旋振荡器.高速冷冻离心机:转速 r/m i n.固相萃取装置.试样的制备与保存 试样的制备 组织取适量新鲜或解冻的空白或供试组织,绞碎,并均质.a)取均质的供试样品,作为供试试样;b)取均质的空白样品,作为空白试样;c)取均质的空白样品,添加适宜浓度的标准溶液,作为空白添加试样.奶取适量新鲜或解冻的空白或供试奶样,混合均匀.a)取混合均匀的供试样品,作为供试试样;b)取混合均匀的空白样品,作为空白试样;c)取混合均匀的空白样品,添加适宜浓度的标准溶液,作为空白添加试样.试样的保存 以下保存.测定步骤 提取 组织取试料g(准确至 g),置 m L聚丙烯离心管中,加 乙腈溶液 m L,涡旋m i n,用冰乙酸调节p H至 ,振荡 m i n,r/m i n离心m i n,取上清液,用 乙腈溶液稀释至 m L,混匀,取 m L(肌肉样品取 m L),备用.奶取试料g(准确至 g),置 m L聚丙烯离心管中,准确加入 乙酸乙腈溶液 m L,涡旋m i n,振荡 m i n,r/m i n离心 m i n,移取全部上清液,备用.净化取弱阳离子交换固相萃取柱,依次用甲醇m L、水m L活化.取备用液过柱,再依次用氨水溶液m L、甲醇m L淋洗,抽干,加乙酸甲醇溶液(p H )m L,洗脱,抽干,收集洗脱液,过微孔尼龙G B 滤膜,供高效液相色谱仪测定.标准曲线的制备精密量取标准工作液适量,用乙酸甲醇溶液(p H )稀释,配制成浓度为 g/m L、g/m L、g/m L、g/m L、g/m L、g/m L、g/m L的系列标准溶液,过微孔尼龙滤膜,供